反复自然流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）是指连续发生2次或2次以上的自然流产，发生率为 0.4%~5.0%，其病因复杂，涉及遗传、免疫、解剖、内分泌、 感染及胚胎畸形等因素^[1]。RSA 使夫妻双方心理和生理受到伤害，目前许多研究关注女性因素所致的 RSA, 对男方因素所致的 RSA 的相关报道较少。本研究对 RSA 患者丈夫的精液进行分析，以了解 RSA 患者丈夫的精液情况。

1  对象与方法

1.1  研究对象

选择2015年1—12月到我院生殖中心就诊的568 例RSA患者丈夫作为试验组，年龄25~39岁， 平均（30.6±4.6）岁，连续发生2 次或 2 次以上的自然流产，排除双方染色体异常及家族性遗传性疾病。选取同期在我中心进行体检的80 例有过一次生育史的男性作为对照组，年龄25~38岁，平均（29.5±3.7）岁，排除染色体异常及家族性遗传性疾病。检测前禁欲3~7 d，在院内用手淫法取完整精液于一次性无菌杯中，立即放入35 ℃孵箱中，待液化。

1.2  检测方法

仪器：清华同方精液分析仪（CASA）和 35 ℃孵箱。 试剂：精子染色液试剂盒（改良 Diff-Quik 法）南京欣迪生物药业，0.9％的氯化钠注射液。

精液常规分析法：待精液完全液化后，记录液化时间，观察黏稠度，测量精液体积。然后按照仪器程序进行计算机精液分析。

精液形态染色法：精液用0.9％的氯化钠注射液洗涤后，弃上清，吹打沉淀取约10 µl 样本拉片，待其完全干燥后，用改良 Diff-Quik 法染色，干燥后进行形态学检查。

1.3  判断标准

依据《WHO 人类精液与精子 - 宫颈黏液相互作用实验检验手册》第五版进行判断^[2]：（1）精液量≥ 1.5 ml；（2）精 子密度≥ 15×106个/ml ；(3)pH ≥7.2 ；(4) 精子活力前向运动≥32% ；(5) 液化时间≤60 min ；（6 ）正常精子形态百分比≥ 4%。

1.4  统计学处理

采用 SPSS 16.0 统计软件进行数据分析。计量数据以x±s 表示，采用 t 检验，P <0.05）。

2  结果

试验组与对照组精子密度、存活率、前向运动百分率比较，差异无统计学意义（P >0.05）；试验组正常形态率低 于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。
                                       

                                 表 1　试验组与对照组精液参数比较（x±s）
                           注：与对照组比较，^aP <0.05

3  讨论

反复流产的发病机制尚不清楚，特别是原因不明的反复流产。男性精子和女性卵子受精后形成胚胎，胚胎的质量与妊娠相关，精子提供了 50% 的遗传物质，精液的异常可影响胚胎的质量。

目前，已有许多研究表明精子的质量差与复发性流产有关^[3]，但绝大多数的研究是针对精子遗传物质，与精液形态的相关性尚无统一认识。对辅助生殖病例的研究发现 ^[4-7]，导致复发性流产的男方高危因素有年龄、染色体异常、正常形态精子百分率过低、抗精子抗体阳性、精子细胞核异常、 精子凋亡率高、精子DNA 碎片等。然而也有研究表明复发性流产与男性精子DNA 碎片率高、形态畸形和 Y 染色体微缺失无关^[8-10]。本研究结果显示，两组男性精液常规分析量、液化时间、pH、存活率、前向运动比较差异无统计学意义（P >0.05 ），试验组正常形态百分率低于对照组（P <0.05）。李兵等^[11] 研究发现 , 精子质量的相关检测对于评价复发性流产具有一定的意义。黄镇华等^[12] 发现精子形态畸形率与精子活力密切相关，随着精子畸形率的升高，精子活率明显减弱。蒋玲^[13] 在探讨 RSA 与精子质量及形态异常的关系时，也发现自然流产患者男性的精子存活率降低，精子活力降低，正常形态精子减少，并指出异常的精子主要是尾部畸形。

精液常规分析及形态学检查是诊断男性不育症的常规手段，精液量、前向运动百分比以及精子的存活率被作为重要 的参数，而精子的形态常常被临床忽视。大多数观点认为受精只需要一个正常的精子即可，绝大多数精子都在通往受精的路上死亡。然而精子形态之所以出现畸形主要由吸烟、酗酒、高温、感染、辐射等引起，形态学上的缺陷可能引起其他功能的下降，从而影响男性的生育力。精子形态的异常分为头部异常、体部异常、尾部异常。精子头部是浓缩的细胞 核和顶体，携带着遗传物质并且兼具与卵巢透明带结合的重要任务，头部的畸形可能会影响顶体反应，使受精率降低，即使受精后胚胎的染色体异常率也会增高，从而导致流产率增高。精子的尾部主要是使精子能够自由的活动，畸形可能影响精子的前向运动速率，导致精子的活力降低，从而影响男性的生育力。Ho 等^[14]认为流产患者丈夫精液畸形率增高，提示流产与精子形态有相关性。有研究表明，精子形态是评价男性生育能力的重要指标^[15]。

综上所述，在治疗反复流产的患者时除了关注女性方面的健康状况更应注重男性的精液常规及形态学的检测。 本研究为临床诊断、治疗反复流产提供了一定的理论依据，为进一步研究畸形精子影响受孕的机制研究打下基础。

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