血细胞分析项目是临床最常用的检验项目，不仅是诊断各种血液病的主要依据，而且也为其他系统疾病的诊断和鉴别提供许多信息，所以血液分析仪测试结果的准确性非常重要。但据了解，目前我国血液分析仪生产厂家大多没有配套校准品，而是通过与一台进口设备比较的方式间 接进行出厂校准，不能保证出厂后测试结果的长期准确性。 作为体外诊断产品质量监督检验单位和血液分析相关产品行业标准的主要起草单位，我所从 2007 年开始着手建立血细胞分析参考测量实验室，以期对此类产品的准确性和溯源性进行更有效的评价。

血细胞分析项目溯源到国际约定参考方法，必须使用只能稳定数小时的新鲜血液作为量值传递的介质，需要建立参考测量实验室长期运行参考方法，投入的人力物力较 大。本研究对血细胞分析参考测量实验室的建立过程进行了回顾梳理，以期为有意从事该项工作的人员提供参考。

（1）首先， 深入调研了国际血液学标准化委员会 （International Council for Standardization in Haematology， ICSH）、 世界卫生组织（World Health Organization， WHO）、 美国临床实验室标准化委员会（Clinical & Laboratory Standards Institute，CLSI）等相关国际血液学标 准化组织发布的相关文献 ^[1-7]，通过走访、电话、会议等多种形式与国际知名的血细胞分析参考测量实验室进行广泛交流，吸取先进经验。（2）根据方法要求，陆续选购 了粒子计数仪、流式细胞仪、相差显微镜、微量毛细管离心机、微量移液枪等多台仪器设备，微量毛细管、黏土封 闭剂、FITC-CD41a 染液、FITC-CD61 染液等多种精密耗材试剂，并严格进行来样确认。同时对各种重要器具进行 了计量检定和内外部校准，建立了相应的质控措施确保器具性能稳定，维护实验室环境保证仪器设备的稳定运行。 （3）采用大量血液样本通过反复摸索优化实验条件，初步建立了红细胞计数、白细胞计数、血小板计数、血红蛋白 含量和血细胞比容这 5 个项目的参考测量程序。（4）由于用于量值传递的新鲜血稳定时间短，参考方法手工操作时 间长，我所血细胞分析参考实验室设置了 7 名技术操作人 员，保证在 4~6 h 之内可以完成至少 3 份样本 5 个测量项 目的测定。对技术操作人员进行了多种形式的培训，个人 重复性和人员间可比性均达到国际参考方法要求，保证方 法测试结果的准确性。（5）研制了 GBW（E）090152“氰化高铁血红蛋白溶液”国家二级标准物质，用于验证血红 蛋白参考方法测试系统的准确性。（6）从 2011 年开始， 使用全血质控物和胶乳微粒与国际知名的血液分析仪制造商参考实验室网络开展定期比对，比对项目包括 4 个项目的参考测量方法和二级标准器的全血细胞项目；同时，采用新鲜血与国内其他建立血细胞分析参考测量方法的实验室定期进行 5 个项目参考方法的比对。通过比对，及时发现纠正问题，进一步验证了所建立参考测量程序测试结果 的准确性。（7）对各个项目中影响参考测量程序测量结果 的不确定度因素进行了分析，通过改进实验室管理和实验 操作流程减小或控制相关的影响量，按照不确定评定相关 规则统计出各个项目的不确定度。其中重复性引起的不确 定度来自近年来新鲜血定值的全部有效数据，可以反映出 实验室一个长期稳定的测量水平。（8）2012 年初，发布实施了血细胞分析参考测量实验室质量体系文件，包括质量 手册、34 个程序文件、近百个作业指导书、工作表格等， 对影响实验室质量的相关“人、机、料、法、环”各个要素一一落实，按计划定期开展内部评审和管理评审，确保实验室质量水平的持续保持和改进。（9）2012 年底，向中国合格评定国家认可委员会（China National Accreditation Service for Conformity Assessment，CNAS）提交了参考测量实验室的资质认可申请。CNAS 依据 ISO/IEC 17025:2005^[8]、 ISO15195:2003^[9] 及 CNAS 特定认可要求 ^[10-12] 依次对实验 室进行了文件评审、现场评审、不符合项整改后评审，于 2013 年 10 月正式授予我所参考测量实验室认可证书（编号 L6477），授权实验室提供红细胞计数、白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量和血细胞比容 5 个项目的定值和校准服务。

实验室自被认可以来，已为多家企业提供了定值血服 务和校准咨询，为相关行业标准 ^[13-14] 的顺利实施提供了保 证，也使国产血细胞分析产品从生产源头上实现量值溯源成为可能。2015 年 5 月，我实验室承担了北京市食品药品 监督管理局组织的在用血液分析仪的评价工作，在小范围内采用定值血评估了在用血液分析仪测试结果的准确性。

综上所述，我所血细胞分析参考实验室的建立进一步 完善了我国血细胞分析领域溯源体系的建设，为我国血细胞分析产品的质量监督提供了更加坚实、可靠的技术保障， 也将在提升国内生产厂家溯源能力和全面提高我国血细胞分析量值溯源水平方面起到巨大的推动作用。

［参考文献］
［1］康娟，张宏 . 血细胞分析标准化 [J]. 医疗装备，2010，23（1）： 34-38.
［2］England JM, Rowan RM, Bull BS, et al. Reference method for the enumeration of erythrocytes and leucocytes[J]. Clin Lab Haemat, 1994, 16(2): 131-138.
［3］ICSH and ISLH. Platelet counting by the RBC/Platelet ratio method: a reference method[J]. Am J Clin Pathol, 2001, 115(3): 460-464.
［4］Zwart A, van Assendelft OW, Bull BS, et al. Recommendations for reference method for haemoglobinometry in human blood (ICSH Standard 1995) and specifications for international haemiglobincyanide standard (4th edition). J Clin Pathol, 1996, 49(4): 271-274.
［5］Bull BS, Houwen B, Koepke JA, et al. Reference and selected procedures for the quantitative determination of hemoglobin in blood[S]. CLSI H15-A3, 2000.
［6］Bull BS, Koepke JA, Simson E, et al. Procedure for determining packed cell volume by the microhematocrit method[S]. CLSI H7-A3, 2000.
［7］Assendelft OWV, Bull BS, Fujimoto K, et al. Recommendations for reference method for the packed cell volume[J]. Lab Hematol, 2001, 7: 148-170.
［8］中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会 . GB/T 27025-2008/ISO 17025:2005 检测和校准实验室能力的通用要求 [S]. 北京：中国标准出版社，2008.
［9］中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会 . GB/T 21919-2008/ISO 15195:2003 检验医学参考测量实验室的要求 [S]. 北京：中国标准出版社，2008.
［10］中国合格评定国家认可委员会 .CNAS-CL01检测和校准实验室能力认可准则 [S/OL]. [2015-06-04] https://www.cnas.org.cn/ rkgf/sysrk/jbzz/2015/06/868982.shtml.
［11］中国合格评定国家认可委员会 .CNAS-CL25 检测和校准实验室能力认可准则在校准领域的应用说明 [S/OL]. [2015-06-04] https://www.cnas.org.cn/rkgf/sysrk/rkyyzz/2015/06/869063.shtml.
［12］中国合格评定国家认可委员会 .CNAS-CL32 检验医学领域参考测量实验室的特定认可要求 [S/OL]. [2015-06-04] https://www. cnas.org.cn/rkgf/sysrk/rkyyzz/2015/06/869047.shtml.
［13］国家食品药品监督管理局 .YY/T0701-2008 血细胞分析仪用校准物（品）, 国家食品药品监督管理局 [S]. 北京：中国标准出版社，2008.
［14］国家食品药品监督管理局 .YY/TXXXX-201X 血液分析仪（报 批稿）[S].