类风湿关节炎（RA）是一种以侵蚀性关节炎为主要表现的全身性自身免疫病。患者的血清中存在多种特异性自身抗体，并且多出现于临床症状之前。目前，RA 的诊断主要依靠临床症状、血清学指标异常及X 线改变等，符合此标准的患者大多已出现骨关节破坏，丧失了最佳的治疗时机，所以，早期血清学特异性抗体的检测就成为早期诊断的关键。但单一抗体的检测的灵敏度和特异度差异很大，只有相关多种特异性抗体联合检测，才能使两者互补，更利于RA 的早期诊断。

1 资料与方法

1.1 临床资料

RA 组203 例，男71 例，女132 例，年龄16~71 岁，平均48.9 岁，均为2010—2015 年在我院门诊及住院患者，临床诊断符合1987 年美国风湿病协会制定的诊断标准。非RA 组393 例，男99 例，女294 例，年龄18~70 岁，平均46.8 岁，其中系统性红斑狼疮（SLE）59 例，硬皮病（Scl）62 例，骨关节炎（AO）27 例，反应性关节炎（ReA）40例，肌炎（PM）60 例，原发性干燥综合征（SS）6 例，血管炎30 例，银屑病29 例，克罗恩病40 例，溃疡性结肠炎40 例。对照组60 名，均为健康体检者，年龄19~68 岁，平均（40.5±12.2）岁。

1.2 方法

（1）抗环瓜氨酸（CCP）抗体的检测：用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测IgG 型CCP 抗体，试剂系瑞典的欧洲诊断公司提供的试剂盒，严格按说明书操作，以大于25 μ/ml 为阳性。（2）类风湿因子（RF），RF-IgG，RFIgA，RF-IgM 的检测：ELISA 检测，试剂系欧蒙公司提供，严格按说明书操作，定量检测，以大于20 EU/ml 为阳性。（3）抗角蛋白抗体（AKA），抗核周因子抗体（APF）检测：荧光法，AKA 试剂采用欧蒙公司提供的荧光试剂盒，以Wistar 大鼠食管的中1/3 段切片，血清1:10 稀释荧光显微镜下观察角质层呈点线状、板层状荧光为阳性。APF 试剂采用和杰创新公司提供的荧光试剂盒，血清1:10 稀释荧光显微镜下观察核周均质圆形、椭圆形荧光颗粒为阳性细胞，大于5 个细胞为阳性，5 个以下为可疑，少于2 个为阴性。（4）C 反应蛋白（CRP）检测：免疫比浊法检测，生化分析仪、试剂均为罗氏公司提供，以大于5 mg/L 为阳性。（5）红细胞沉降率（ESR）检测：采用Westergren 法，男大于15 mm/h，女大于20 mm/h 为升高。（6）抗Sa 抗体（Sa）：免疫印迹法检测，试剂盒由采用欧蒙公司提供，在分子量为50 kD 和55 kD 部位出现条带者为阳性。

1.3 统计学处理

采用SPSS 10.0 统计软件进行数据分析。计数资料以率表示，采用χ2 检验。以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1  3 组CCP，AKA，APF，RF，Sa，CRP，ESR 检测结果比较

RA 组的7 项指标阳性率明显高于其他两组（P<0.05），见表1。

表1　3 组CCP，AKA，APF，RF，Sa，CRP，ESR 阳性结果比较[ 例（%）]

 注：与RA 组比较，aP<0.05


2.2 7 项指标在RA 诊断中的灵敏度与特异度比较

检测单一抗体， 敏感度为RF>CCP>CRP>ESR>APF>AKA>Sa；特异度为CCP>AKA>Sa>APF>RF>CRP>ESR。7 项指标联合检测敏感度为87％，特异度为97％。见表2。

表2　7 项检测指标的灵敏度与特异度比较（％）

2.3 RF 的检测

采用RF-IgG，RF-IgA，RF-IgM 联合检测，敏感度最好的是RF-IgM，特异度较好的是RF-IgG，见表3。

表3　RF-IgG，RF-IgA，RF-IgM 检测的灵敏度与特异度比较（％）

3 讨论

RA 是一种常见的，以侵蚀性关节为主要表现的全身性自身免疫病，其病因和发病机制尚未明确^[1]，我国大陆地区的RA 发病率为0.20％ ~0.36％，患者在发病两年内即可出现不可逆转的骨关节破坏，最后导致关节畸形、功能丧失，甚至致残。鉴于RA 的高致残性，如何早期准确诊断RA 成为了临床和实验室研究的关键。RA 患者的血清中一般都含有一种或几种自身抗体，RF 是临床上普遍采用的检测指标，RF 与IgG 形成免疫复合物激活补体系统，诱发炎症反应，RF 抗体是抗人或动物IgG 分子可结晶（Fc）片段上抗原决定簇的特异性抗体，包括IgG，IgA，IgM，主要是IgM，其敏感度虽高，但特异度却偏低，部分RA 患者检测不出RF-IgM，应进一步检测RF-IgA、RF-IgG。有研究报道应用ELISA 进行RF 分型定量检测，特别是3 种抗体的联合检测，能够较好互补单一检测灵敏度与特异度的不足之处，RF 滴度越高，对RA 的诊断特异度越高。抗CCP 抗体主要为IgG 类抗体，可以人工合成，在RA 患者出现明显的改进损伤之前，对RA 的早期诊断具有很好的灵敏度及特异度，并且与RA 的关节侵蚀情况及预后密切相关^[2]，国外一项Meta 分析，抗CCP 抗体检测是RA 的一项特异度很高的血清学指标，也是骨关节出现影像学改变的高危因素^[3-4]，并且是RA 患者骨关节破坏严重程度的特异性指标，具有较好较高的应用价值。

AKA 是1997 年Young 等发现并命名的抗体，其成分主要是IgG，AKA 对RA 具有很好的阳性率与特异度^[5-6]。APF是1995 年Sebbag 从颊黏膜细胞中提取的抗体，其检测的灵敏度比AKA 高，也是早期诊断RA 的有效指标之一^[7]。AKA，APF，CCP 3 者含有相同的抗原成分，同时联合检测可以提高灵敏度与特异度，对RA 的早期诊断具有重要意义^[8-9]。抗Sa抗体是1994 年由加拿大学者Despres 首先从患者血清中发现，相应的抗原为Sa 抗原，存在于人体的正常组织及RA 患者的血管滑膜中，主要抗体为IgG 型，且多出现于疾病的前几个月内，在RA 患者的血管滑膜中有高滴度的抗Sa 抗体存在，由此可以推断Sa 抗体可能为推动原位免疫损伤发展过程的抗原成分之一，且对RA 的诊断具有很好的特异度。CRP 是急性感染和组织损伤有密切关系的主要急性时相蛋白，且呈正相关，在机体中能与多种物质结合，这一特性是其在急性时相中发挥作用的前提，CRP 水平的高低还与骨质破坏的发生发展呈正相关，并与疗效相关。ESR 也是种具有很好重复性的急性时相反应指标，在RA 的疾病活动期增高，若其始终保持增高状态，可提示病情有进展的趋势^[10-11]。CRP 与ESR 虽然特异度稍差但能很好地反映病情的发生发展及其预后。

综上所述，RA 的早期诊断血清学指标，因其敏感度与特异度各有优势，单一检测一种抗体对RA 的早期诊断不利，也无法早期确证早期治疗，只有进行多种抗体的联合检测，才能提高检测的敏感度与特异度，才能达到早期诊断早期治疗的目的。

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