在全球范围内具有较高致死率的恶性肿瘤，其发病率在近十年呈显著上升趋势，据 2020 年全球癌症统计数据显示，肝癌新发病例超 90 万例，死亡病例达 83 万例，严重威胁人类健康 ^[1]。早期诊断是改善患者预后的关键环节，然而临床实践中仍面临诊断敏感性不足、鉴别困难等挑战。目前，影像学检查联合血清学标志物检测是临床诊断 PHC 的主要模式，但不同病灶生物学特性的异质性常导致诊断延迟，特别是在肝硬化等癌前病变患者中，良恶性病变的鉴别仍较困难 ^[2]。甲胎蛋白（alpha-fetoprotein, AFP）作为经典的肝癌血清标志物，虽临床应用时间较长，但其诊断效能存在明显局限。研究表明，30%~ 40% 的 HCC 患者 AFP 始终处于正常水平，而在慢性肝炎、肝硬化等良性疾病中亦可出现异常升高，这种假阴性和假阳性现象严重影响诊断准确性 ^[3]。近年来，异常凝血酶原Ⅱ（protein induced by vitamin k absence or antagonist-Ⅱ,PIVKA- Ⅱ）作为新型肿瘤标志物受到关注，其异常升高与肝癌细胞的异常凝血酶原合成密切相关^[4]。但现有研究多聚焦于单一标志物的性能比较，对联合检测策略的系统性研究仍显不足。基于此，本研究旨在分析 AFP、PIVKA- Ⅱ联合检测对 PHC 的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取 2024 年 10 月至 2025 年 3 月山东省公共卫生临床中心收治的 41 例初治 PHC 患者为 PHC组，同期选取 39 例肝硬化患者为肝硬化组，40 例健康体检者为对照组。PHC 组中男 25 例，女 16 例；年龄 40 ~ 71 岁，平均（51.52±6.28）岁；体质量指 数（body mass index, BMI）16.5 ~ 27.8 kg/m² ，平均（22.24±1.65）kg/m²  。 肝硬化组男 21 例，女 18 例；年龄 35 ~ 72 岁，平均（51.74±6.39）岁；BMI 16.3 ~ 27.9 kg/m² ，平均（22.37±1.49）kg/m²  。对照组男 23 例，女 17 例；年龄 27~ 65 岁，平均（50.19±6.15） 岁；BMI 16.8 ~ 27.2 kg/m² ，平均（22.19±1.74）kg/m²  。三组一般资料比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。本研究遵循《赫尔辛基宣言》原则，患者了解研究后自愿加入，已签署知情同意书。

纳入标准：PHC 组符合《原发性肝癌诊疗指南（2026 年版）》^[5] 中关于 PHC 诊治标准；初次发病；年龄 > 18 岁；病例资料完整。肝硬化组符合《中国肝硬化临床诊治共识意见》^[6] 中关于肝硬化诊断标准；初次发病；年龄 > 18 岁；病例资料完整。对照组健康体检者查体各项指标均正常。排除标准：近 1 个月服用维生素 K；合并凝血功能障碍；预计生存期 < 6 个月；合并其他恶性肿瘤。

1.2 方法

采集所有受试者晨起空腹肘静脉血 5 mL 至无抗凝剂真空促凝管中，样本在室温下静置 30 ~60 min 待其充分凝集，随后立即置于台式离心机（北京京立离心机有限公司，型号：5425R），于室温条件下以速率 3 000 r/min、半径 14 cm 离心 10 min，取上血清分装于无菌离心管中，随即转移至 -80 ℃超低温冰箱内冷冻保存以待批量检测。检测当日，将冷冻血清样本置于 4℃环境下缓慢解冻，采用深圳迎凯生物科技有限公司生产的 Shine i2910 型全自动化学发光免疫分析仪及配套试剂，严格按照操作规程，对血清中 AFP、PIVKA- Ⅱ水平进行定量测定，每批次检测均包含高、低 2 个浓度的质控品进行质量监控，且所有样本均在采集后的 1 个月内完成检测。

1.3 观察指标

（1）比较三组 AFP、PIVKA- Ⅱ水平；（2）比较不同 PHC 分 期（ Ⅰ~Ⅱ 期、 Ⅲ~Ⅳ 期） 患 者AFP、PIVKA- Ⅱ水平；（3）绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic, ROC）曲线，计算曲线下面积（area under curve, AUC），分析 AFP、PIVKA- Ⅱ单一与联合检测对 PHC 的诊断效能。

1.4 统计学处理

采用 SPSS 23.0 统计软件进行数据分析。计量资料以 x ±s 表示，采用 t 检验。计数资料以率表示，采用 χ² 检验。P< 0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组 AFP、PIVKA- Ⅱ水平比较

PHC 组 AFP、PIVKA- Ⅱ水平高于对照组、肝硬化组（P< 0.05）；肝硬化组 AFP 水平高于对照组（P< 0.05）。见表 1。

表 1 三组 AFP、PIVKA- Ⅱ水平比较（x ±s）

表001

注：PHC 为原发性肝癌；AFP 为甲胎蛋白；PIVKA- Ⅱ为异常凝血酶原Ⅱ。

2.2 PHC 组不同分期患者 AFP、PIVKA- Ⅱ水平比较

PHC Ⅲ ~ Ⅳ 期 组 AFP、PIVKA- Ⅱ 水平高于Ⅰ ~ Ⅱ期组（P< 0.05），见表 2。

表 2 不同 PHC 分期 AFP、PIVKA- Ⅱ水平比较（x ±s）

注：PHC 为原发性肝癌；AFP 为甲胎蛋白；PIVKA- Ⅱ为异常凝血酶原Ⅱ。

2.3 AFP、PIVKA- Ⅱ单一与联合检测对 PHC 的诊断效能

AFP、PIVKA- Ⅱ单一与联合检测的 AUC 分别为 0.732、0.771、0.891，联合检测对 PHC 的诊断效能最高（P < 0.05）。见表 3。

表 3 不同检测方法对 PHC 的诊断效能

注：PHC 为原发性肝癌；AFP 为甲胎蛋白；PIVKA- Ⅱ为异常凝血酶原Ⅱ；AUC 为曲线下面积。

3 讨论

PHC 指原发于肝细胞和（或）肝内胆管上皮细胞的恶性肿瘤，临床分为混合型肝癌、肝细胞癌及肝内胆管癌，以肝细胞癌最为常见，占比达到75%~ 85%^[7]。资料显示，2022 年全球新增 PHC 患者约 90 万例，在我国所有恶性肿瘤中 PHC 发病率居第 4 位，病死率居第 2 位 ^[8-9]。肝癌作为全球第四大癌症相关死亡原因，其早期诊断始终是改善预后的核心挑战。

本研究结果显示，PHC 组 AFP、PIVKA- Ⅱ水平高于对照组、肝硬化组（P< 0.05）；肝硬化组AFP 水平高于对照组（P< 0.05）；PHC Ⅲ ~ Ⅳ期组 AFP、PIVKA- Ⅱ水平高于Ⅰ ~ Ⅱ期组（P<0.05）。分析原因为，PHC 发生发展中，γ- 谷氨酰羧化酶活性会显著降低，阻碍凝血酶原前体正常羧基化，促使 PIVKA- Ⅱ大量生成并释放入血，形成特异性血清标志物。与此同时，肝实质损伤程度与 AFP表达水平呈正相关，两者浓度梯度变化可共同反映肿瘤负荷、微血管浸润及淋巴结转移风险。对AFP 而言，其升高可能源于肿瘤体积增大导致的分泌量增加，而 PIVKA- Ⅱ的升高机制则更为复杂：晚期肝癌常伴随血管侵犯及转移，激活缺氧诱导因子（HIF-1α）通路，进而上调凝血酶原异常合成酶 ^[10-12]。值得注意的是，Ⅲ ~ Ⅳ期患者中PIVKA- Ⅱ的增幅显著高于 AFP，可能与其在肿瘤侵袭性评估中的独特作用相关 ^[13-14]。

本研究结果显示，AFP、PIVKA- Ⅱ联合检测对 PHC 的诊断效能优于单一检测，可为 PHC 诊治提供指导。分析原因为，AFP 是一种糖基化白蛋白，由胚胎期卵黄囊、未分化肝细胞及胎儿胃肠道合成，是肝细胞癌的核心血清学诊断标志物 ^[15]。其与肝细胞癌细胞膜受体结合后，通过激活 Ca2-/PI3K/AKT 等信号通路促进 C-FOS、SRC 等癌基因表达，进而驱动肿瘤增殖与分化。此外，AFP 可通过抑制凋亡关键酶 Caspase-3 活性，阻断 PHC 细胞程序性死亡。研究发现，70% ~ 80% 的 PHC 患者血清 AFP 显著升高，其动态水平与肿瘤负荷、术后复发及治疗应答显著相关；约 20% ~ 30% 的肝细胞癌病例 AFP 呈阴性表达，此类免疫沉默表型易导致影像学筛查前的诊断延迟，进而影响根治性治疗机会 ^[16]。PIVKA- Ⅱ是继 AFP 后具有重要临床价值的肝癌辅助诊断标志物。其形成机制与维生素 K代谢异常密切相关：维生素 K 作为凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ羧基化修饰的必需辅酶，在肝脏功能受损或存在维生素 K 拮抗剂时，γ- 谷氨酰羧化酶活性受抑制，导致凝血酶原氨基末端谷氨酸残基羧基化受阻，生成无凝血活性的异常代谢产物。但需警惕其他病理生理状态对检测结果的干扰：生理性维生素 K 不足（如新生儿、长期酗酒）、肝胆系统疾病（胆汁淤积性黄疸、胆道梗阻）、代谢性疾病（慢性肾脏病）及药物影响（华法林、头孢类抗生素）均可导致 PIVKA- Ⅱ水平异常升高 ^[17]。建议结合患者维生素 K 补充史、凝血功能指标及影像学特征进行综合判断，以降低假阳性风险。

综上所述，AFP 联合 PIVKA- Ⅱ 检测对 PHC的诊断效能较高，可为临床医师诊疗提供可靠依据。

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