2022 年，根据国家药品监督管理局要求，医疗器械检验机构按照经注册或备案产品的技术要求开展 β₂- 微球蛋白（beta 2-microglobulin，β₂M）检测试剂盒（免疫比浊法）抽检工作，检验项目涉及准确度、线性、重复性，其中河北省药品医疗检验研究院负责北京地区产品的检验工作。本研究对7 个不同厂家的 β₂M 检测试剂盒就产品技术要求引用行业标准情况、计量溯源性等资料进行汇总，并对试剂盒的准确度、线性、重复性性能进行评价，使用标准物质 ERM-DA470k 和第三方质控对准确度进行评价，总结 β₂M 检测试剂盒质量评价目前存在的问题，并为后续加强质量控制提出建议。

1  β₂M 检测试剂盒抽检结果

1.1  产品技术要求引用行业标准情况

β₂M 检测试剂盒（免疫比浊法）现行有效的行业标准是 YY/T 1442 —2016《β₂- 微球蛋白定量检测试剂（盒）》^[1]。梳理总结 7 家的 β₂M 检测试剂盒的 3 个项目产品技术要求引用行业标准情况（表 1），只有线性项目均达到行业标准要求，准确度和重复性达到行业标准要求仅有 3 家。准确度项目检测不符合行业标准要求的厂家中，1 个厂家产品采用回收试验，行业标准中方法只有相对偏差和比对试验，无法判断优劣；2 个厂家产品采用相对偏差，限值为 ±15%，低于行业标准要求（±10%）；1 个厂家产品采用比对试验，样本浓度分段点为 2.0 mg/L，在低浓度时相对偏差为 ±0.4 mg/L，低于行业标准要求（分段点 1 mg/L，相对偏差 ±0.2 mg/L）。重复性项目检测不符合行业标准要求的厂家中，有 1 个厂家产品限值为 12%，低于行业标准（10%）；有 3 个厂家产品检测样本使用高、低浓度，缺少行业标准中的中浓度。

表 1 7 个厂家 β₂M 检测试剂盒引用行业标准情况（家）

1.2  计量溯源性

测量结果溯源是实现医学实验室标准化的最重要策略，旨在实现不同实验室、不同测量方法及不同厂家试剂盒的测量结果的准确、可比。计量溯源性是通过文件规定的不间断的校准链，将测量结果与参考标准联系起来的测量结果特性，校准链中的每项校准均会引入测量不确定度。β₂M 检测试剂盒的校准传递方案具有国际约定校准品（非一级），但无国际约定参考测量程序。二级参考物质逐级将量值和不确定度传递至样本结果。

对 7 个厂家 β₂M 检测试剂盒检验声明中使用的校准品品牌和溯源进行统计，发现有 5 个厂家校准品为厂家配套，其中 2 个厂家校准品溯源至国际标准物质 β₂M，3 个厂家校准品溯源至企业工作校准品；2 个厂家校准品使用其他厂家的校准品，均为同一品牌，且校准品可溯源至国际标准物质 ERMDA470k。在梳理资料时发现，有 2 个厂家试剂盒说明书中推荐的校准品品牌与企业抽验时提供的校准品品牌不一致，厂家说明书中使用朗道校准品，提供的校准品为其他厂家校准品和厂家配套校准品。

6 个品牌校准品中，2 个品牌校准品的靶值单中有量值和不确定度信息，4 个品牌校准品只有量值信息。有 2 个厂家在产品技术要求附录中有校准品溯源过程，其他厂家仅在试剂盒说明书或校准品说明书中提供溯源物质。6 个品牌校准品中仅有 1 个品牌校准品按不同仪器系统列出量值，其他品牌均提供 1 个量值。

1.3  性能评价

1.3.1  检验样本信息

由于检验机构在抽检中难以获得人源样品，一般由被抽样单位提供检验样本如线性高值、重复性样本。本次抽检北京地区产品由北京市监管人员抽样，并由河北省药品医疗检验研究院负责检验工作。线性和重复性检验使用的线性高值、重复性样本均由厂家提供，为纯品溶液或人源样本。7 个厂家β₂M 检测试剂盒的准确度检验方法涵盖相对偏差、比对试验和回收试验。4 个厂家使用相对偏差方法，其中 3 个厂家使用 B2M 作为准确度检验样本因标准物质断货而缺项检验，1 个厂家使用 ERMDA470k 检验。1 个厂家使用回收试验方法，厂家声称回收试验所用纯品因断货而无法提供缺项检验。2 个厂家使用比对试验方法，均提供 40 个人源样本。

此外，本研究使用 ERM-DA470k 和第三方质控朗道多项液相蛋白质控水平 2（货号：PS2683，批号：616LPC，2.86 ~ 4.28 mg/L）、水平 3（货号：PS2684，批号：635LPC，4.53 ~ 6.79 mg/L）对 7 个厂家试剂盒进行准确度探索性研究。

1.3.2  检验结果

7 个厂家 β₂M 检测试剂盒的检验结果显示，按照经注册或备案的产品技术要求检验项目均为合格。部分产品技术要求低于行业标准要求，但依据行业标准判定，此次 7 个厂家产品 3 个检验项目均符合行业标准要求。

按照 YY/T 1442—2016《β₂- 微球蛋白定量检测试剂（盒）》^[1] 行业标准中准确度的检验方法，对 7 个厂家 β₂M 检测试剂盒使用 ERM-DA470k 进行准确度检验，重复检测 3 次，分别计算相对偏差。结果显示，5 个厂家产品相对偏差在 ±10% 内，符合行业标准要求；2 个厂家产品相对偏差均超出15%，不符合行业标准要求。查看不符合行业标准的 2 个厂家校准品溯源，发现 1 个厂家校准品通过已上市公司产品比对赋值，测试其比对公司产品，发现其结果在 3% 以内，由此推测其校准品赋值存在问题；1 家校准品溯源至 NIBSC code:B2M，但另1 家溯源至 NIBSC code:B2M 测试结果在 5% 以内，由此推测其溯源过程可能存在问题。

对 7 个厂家 β₂M 检测试剂盒使用第三方质控朗道多项液相蛋白质控水平 2、水平 3 进行准确度检验，重复检测 3 次，分别计算相对偏差。结果显示，水平 2 测试相对偏差在 ±10% 内有 3 个厂家，水平 3 测试相对偏差在 ±10% 内有 4 个厂家，2 个水平测试相对偏差均在 ±10% 内仅有 2 个厂家（2 个厂家使用 ERM-DA470k 检验准确度的相对偏差超出 15%）。由此可见，对于不同检验样本的准确度检测结果差异较大。

2  监督抽验风险预警及监管建议

本次抽验北京地区的 7 个厂家，3 个项目均未检出不符合项，但在对资料审核、贯标统计分析及检验过程中发现一些实际问题，存在风险点。例如，部分企业产品技术要求低于行业标准，且更新较慢，说明书中配套校准品与抽验实际使用校准品不一致，产品溯源链难以追溯，准确度因无法提供样品而缺项检验，使用商业化血清样本测试，不同厂家测试结果差异较大。针对这些风险点提出以下 5 点建议，为体外诊断试剂市场监管提供参考依据。

2.1  规范溯源

在理想情况下，不同制造商均使用 ERMDA470k 作为二级参考物质，样本检验结果溯源应一致、等效可比。ISO 17511:2020 规定了计量学溯源的责任承担主体，用户按照说明书使用，制造商提供完整的计量溯源链；如用户修改测量程序，用户验证并阐述计量溯源性 ^[2]。试剂盒说明书中如果只提供计量溯源性的简要说明、溯源至高阶参考材料和 / 或参考测量程序的名称，而未说明实施步骤，用户则无法获得详细的溯源信息 ^[3]。

GB/T 21415—2008《体外诊断医疗器械 生物样品中量的测量 校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》标准发布以来，产品注册工作中开始重视计量溯源性，行业对其认识理解程度在不断加深 ^[4-5]。本次抽检中，校准品未根据不同仪器给出量值，缺少不确定度信息及校准层级，说明对计量溯源的实施性不够。除将参考物质的量值准确传递至校准品外，测量结果的不确定度是否满足该项目在临床应用中的分析质量标准也同样重要 ^[6-7]。建议产品注册和变更时，提高对溯源中校准层级、不确定度的重视，规范溯源过程并形成技术文件，方便用户获取，为用户计算测量结果的不确定度奠定基础；同时，建议细化量值溯源实施细则标准，增加实例，进一步指导生产企业对量值溯源的实施。

2.2  研制二级参考物质

本次监督检验中，4 个企业因无法提供准确度检测样本致使该项目无法检测。这一现象反映了企业在成品检验中存在把控成品质量风险，监管部门对此应加以重视。

β₂M 检测试剂盒检验中，检测单位多采用二级参考物质检测试剂盒性能。二级参考物质与临床样本基质类似，尽可能反映临床样本的特征，减少基质相关的不互换性偏差。ERM-DA470k 的互换性评估了 11 种试剂和平台组合 ^[8-9]。杨忠等 ^[10] 评价了10 种不同试剂盒与 ERM-DA470k 两两组成的检测系统组合的互换性，82% 的系统组合有互换性。

在校准传递方案中，制造商对互换性的判定仅适用规定的条件和测量系统。如制造商选定的测量程序、常规测量程序和终端用户测量程序是相同的，二级参考物质与临床样本有互换性即可，工作校准品和产品校准品无互换性要求，使用有互换性的二级参考物质，制造商可更易以更低成本实现计量溯源。

在标准化的过程中，不只重视计量溯源性，更要考虑其可实施性 ^[11]。血清基质的二级标准物质是实现临床测量标准化的重要步骤，因此建议研制血清基质的国家二级标准物质，进一步指导国内产品的量值溯源工作，建立完整的量值溯源体系，降低企业溯源成本，提高检测结果的准确性和可比性，同时为监管机构提供监管工具。

2.3  统一检验样本

体外诊断试剂检测样本由被抽样单位提供，检验机构对样本组成把握度不够。YY/T 1789.4—2022《体外诊断检验系统性能评价方法第 4 部分：线性区间与可报告区间》^[12] 要求，建立线性区间应该使用临床样本，监督检验中发现使用线性高值样本为纯品配制，与临床样本存在基质效应问题。使用第三方质控测试发现，对于同一样本使用不同检测系统的测试结果存在较大差异。建议监管部门探索使用临床样本统一制备，方便对线性、重复性等项目进行考察，结果更有可比性。

2.4  加强企业对标准执行及更新管理

YY/T 1442—2016《β₂- 微球蛋白定量检测试剂（盒）》^[1] 于 2017 年 1 月 1 日开始实施，2022 年监督抽验时已发布超过 5 年。医疗器械注册证有效期为 5 年，有效期届满需要延续注册。延续注册后仍有企业技术要求低于行标，更新较慢。建议加强对各级监管部门、审批部门和注册人的标准宣贯，鼓励申请人、备案人采用推荐性标准。企业在制定产品技术要求时，除依据医疗器械相关法规、标准外，也应关注使用机构对产品性能的要求。卫生行业标准 WS/T 403—2024《临床化学检验常用项目分析质量标准》^[13] 中β₂M 的允许不精密度（重复性）为7.5%，允许偏倚（正确度）为 10.0%，对重复性的要求高于 YY/T 1442—2016《β₂- 微球蛋白定量检测试剂（盒）》^[1] 的要求（10%）。因此，建议注册人实时关注标准更新情况，对产品技术要求中相应的分析性能指标要求也应做到实时更新，不断提升提高产品质量，满足市场需求，也便于在质控、监管环节对产品进行一致性评价。

2.5  补充抽样范围

本次 β₂M 检测试剂盒抽检均于注册人处抽样。近年来，体外诊断试剂国家监督抽验工作大多于生产环节抽样，对产品流通环节和使用环节抽样较少。2018 年体外诊断试剂国家监督抽验情况分析结果显示，有效样品量占计划抽样量为 33% ~ 71%，有效抽样量较低 ^[14]。抽样时北京地区 β₂M 检测试剂盒注册证 24 张，但实际到样仅 7 家，主要原因可能是因体外诊断试剂有效期较短（12 ~ 18 个月），抽样时要求样品距离失效期不少于 6 个月，厂家库存满足抽样要求的较少。建议应重视流通及使用环节中，运输、存储条件对检测质量的影响，并与省级监督抽验在抽样范围中形成互补 ^[15-16]；加强对抽样环节、接收样品环节人员针对性、统一性培训，避免因运输条件不当、不适配机型、缺少必需样品等出现退样。

3  总结

本次监督抽验，北京地区 7 个厂家部分项目产品技术要求低于行业标准，检验结果均符合行业标准要求，说明企业在提升自身产品质量，同时也要及时更新技术文件。企业在关注行业标准的同时，也要关注临床使用相关标准，不断提高产品质量，满足临床使用需求。计量溯源性的规范和实施是提高检测结果的可比性、精准性关键。目前 β₂M 检测试剂盒的实施性较差，制定量值溯源实施细则标准、研制二级参考物质可进一步指导国内企业建立统一的量值溯源体系，使其更易以更低成本实现计量溯源，也便于各环节对产品进行一致性评价。

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